新生大鼠脑组织在神经端子突形圆锥花序分布超微结构形态分析中的制备

我们的实验室和其他许多实验室利用透射电子显微镜的高分辨能力来研究突触囊泡的形态和空间组织。为了获得高质量的电子显微镜, 从而获得对突触前囊泡分布进行定量分析所需的形态学细节程度, 最佳样品制备至关重要。化学固定是标本制备过程中的第一步, 对保持精细的超微结构至关重要。采用戊二醛-甲醛溶液固定血管, 然后用四氧化铬处理振动原子切片标本, 稳定分子的最大数量, 特别是蛋白质和脂类, 并取得优异的保护效果超微结构。然后用反染色、连续脱水和树脂包埋法对组织进行处理。在样品加工过程中, 用醋酸铀进行整体染色 (即在树脂包埋前对振荡器切片组织进行染色) 增强了内源性对比, 并稳定细胞成分的提取。通过将醋酸铀作为超薄切片上的染色后, 可以进一步增加对比度。醋酸铀处理后, 用柠檬酸铅双染色超薄切片, 通过选择性结合醋酸铀增强含核酸结构的电子不透明度, 提高图像分辨率。透射电子显微镜是一个强大的工具, 用于表征突触囊的形态细节, 并量化其大小和空间组织在终端 bouton。然而, 由于它使用固定组织, 透射电子显微镜只能提供有关生命或进化过程的间接信息。因此, 当主要目的是研究突触囊泡贩运和外分泌的动态或功能方面时, 应考虑其他技术。