JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Abstract

Biology

Zuivering van bloedplaatjes van muis Blood

Published: May 7th, 2019

DOI:

10.3791/59803

1Division of Experimental Hematology and Cancer Biology, Cincinnati Children's Hospital Medical Center, 2University of Cincinnati College of Medicine

Abstract

De bloedplaatjes worden gezuiverd van geheel bloed om hun functionele eigenschappen te bestuderen, die van rode bloedcellen (RBC), witte bloedcellen (WBC), en plasmaproteïnen vrij zouden moeten zijn. We beschrijven hier zuivering van bloedplaatjes uit muis bloed met behulp van drie-voudige meer iohexol gradiënt medium ten opzichte van het bloedmonster volume en centrifugeren in een swingende emmer rotor op 400 x g voor 20 min bij 20 ° c. De terugwinning/opbrengst van de gezuiverde bloedplaatjes was 18.2-38.5%, en de gezuiverde bloedplaatjes waren in een rustende staat, die geen significant aantal van RBC en WBC bevatten. De gezuiverde bloedplaatjes behandeld met trombine toonde tot 93% activering, met vermelding van hun levensvatbaarheid. We hebben bevestigd dat de gezuiverde bloedplaatjes voldoende zuiver zijn met behulp van flow flowcytometrische en microscopische evaluatie. Deze bloedplaatjes kunnen worden gebruikt voor genexpressie, activering, granule release, aggregatie, en adhesie assays. Deze methode kan worden gebruikt voor de zuivering van bloedplaatjes uit het bloed van andere soorten ook.

Explore More Videos

Biologie

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved