Transferência de neutrophils tumor-associados manipulados em ratos do tumor-rolamento para estudar seu potencial angiogênico em vivo

A contribuição de neutrófilos para a regulação da tumorigenese está recebendo maior atenção. Estas pilhas são heterogêneas, e dependendo do meio do tumor pode possuir a capacidade pro-ou do anti-tumor. Um dos citocinas importantes que regulam funções do neutrófilo em um contexto do tumor é tipo mim interferons. Na presença de interferões, neutrófilos ganham propriedades antitumorais, incluindo citotoxicidade ou estimulação do sistema imunológico. Inversamente, a ausência de uma sinalização do interferon conduz à atividade proeminente do pro-tumor, caracterizada com a estimulação forte da angiogênese do tumor. Recentemente, nós poderíamos demonstrar que as propriedades pro-Angiogenic dos neutrófilos dependem da ativação da via de sinalização do Fosforribosiltransferase do nicotinamida (NAMPT) nestas pilhas. A inibição desta via em neutrófilos tumor-associados conduz a seu phenotype antiangiogénico potente. Aqui, Nós demonstramos nosso modelo recentemente estabelecido permitindo in vivo a avaliação do potencial tumorigênico de neutrófilos tumor-associados manipulados (tans). Logo, os neutrófilos tumor-associados pro-Angiogenic podem ser isolados dos ratos interferon-deficientes do tumor-rolamento e repolarizado no phenotype antiangiogénico obstruindo da sinalização de NAMPT. A atividade angiogênica dessas células pode ser posteriormente avaliada por meio de um ensaio de anel aórtico. Os TANs antiangiogénicos podem ser transferidos em receptores do tipo selvagem do tumor-rolamento e o crescimento do tumor deve ser monitorado por 14 dias. No dia 14 camundongos são sacrificados, tumores removidos e cortados com sua vascularização avaliada. Globalmente, nosso protocolo fornece uma nova ferramenta para in vivo avaliar a capacidade angiogênica de células primárias, tais como neutrophils associados a tumores, sem a necessidade de usar modelos de linha celular de neutrófilos artificiais. vc