Abstract
Biology
Live-Cell Imaging er en mikroskopi teknik, der anvendes til at undersøge celle-og protein dynamik i levende celler. Denne Imaging metode er ikke giftigt, generelt ikke forstyrrer celle fysiologi, og kræver minimal eksperimentel håndtering. De lave niveauer af teknisk interferens gør det muligt for forskerne at studere celler på tværs af flere cyklusser af mitose og observere meiose fra start til. Ved hjælp af fluorescerende Tags såsom grøn fluorescerende protein (GFP) og rødt fluorescerende protein (RFP), forskere kan analysere forskellige faktorer, hvis funktioner er vigtige for processer som transkriptionen, DNA-replikering, samhørighed, og adskillelse. Kombineret med dataanalyse ved hjælp af Fiji (en gratis, optimeret ImageJ version), Live-Cell Imaging tilbyder forskellige måder at vurdere protein bevægelse, lokalisering, stabilitet, og timing, samt nuklear dynamik og kromosom adskillelse. Men som det er tilfældet med andre mikroskopi metoder, er levende celle billeddannelse begrænset af de iboende egenskaber af lys, som sætter en grænse for opløsningen magt ved høje forstørrelser, og er også følsom over for foto blegning eller fototoksicitet ved høj bølgelængde Frekvenser. Men, med en vis omhu, efterforskere kan omgå disse fysiske begrænsninger ved omhyggeligt at vælge de rigtige betingelser, stammer, og fluorescerende markører for at muliggøre en passende visualisering af mitotiske og meiotiske hændelser.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved