Celcyclus-specifieke meting van γH2AX en apoptosis na genotoxische stress door flow Cytometrie

De gepresenteerde methode of licht gewijzigde versies zijn bedacht om specifieke behandelings responsen en bijwerkingen van verschillende anti-kankerbehandelingen te bestuderen, zoals gebruikt in de klinische oncologie. Het maakt een kwantitatieve en longitudinale analyse van de DNA-schade reactie mogelijk na genotoxische stress, zoals geïnduceerd door radiotherapie en een veelheid aan anti-kanker drugs. De methode dekt alle stadia van de DNA-schade reactie, het verstrekken van eindpunten voor inductie en reparatie van DNA dubbel strand Breaks (DSBs), arrestatie van de celcyclus en celdood door Apoptosis in geval van herstel falen. Het combineren van deze metingen geeft informatie over de celcyclus afhankelijke behandelingseffecten en maakt zo een grondige studie mogelijk van de wisselwerking tussen cellulaire proliferatie en het omgaan met DNA-beschadiging. Aangezien het effect van veel kankertherapieën, waaronder chemotherapeutische middelen en ioniserende straling, beperkt is tot of sterk varieert naargelang de specifieke celcyclus fasen, vertrouwen correlatieve analyses op een robuuste en haalbare methode om de behandelingseffecten te beoordelen op het DNA in een celcyclus-specifieke manier. Dit is niet mogelijk met assays met één eindpunt en een belangrijk voordeel van de gepresenteerde methode. De methode is niet beperkt tot een bepaalde cellijn en is grondig getest in een veelheid van tumor en normale weefsel cellijnen. Het kan op grote schaal worden toegepast als een uitgebreide genotoxiciteitstest op vele gebieden van oncologie naast radio-oncologie, waaronder milieueffectbeoordeling, geneesmiddelen screening en evaluatie van genetische instabiliteit in tumorcellen.