A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Biology
Durotaksis, hücrelerin gerilim degradelerini algılama ve tepki verme sürecidir. Bu süreci in vitro olarak incelemek için, bir hücrenin altında yatan substrat sertliği manipüle edilmelidir. Dereceli sertlik ve uzun süreli göç testleri ile hidrojeller durotaksis çalışmalarında yararlı kanıtlanmış olsa da, substrat gerginliği yerel değişikliklere hemen, akut tepkiler bireysel hücre hareketleri ve subselliler sinyal olayları odaklanmış çalışma sağlar. Hücrelerin altta yatan substrat sertliğini algılama ve yanıt verme yeteneğini tekrar tekrar test etmek için, deforme edilebilir hidrojeller üzerinde kültürlenmiş bireysel hücrelere artan gerilimin akut degradelerinin uygulanması için değiştirilmiş bir yöntem kullanılır ve bu yöntem gerçek zamanlı olarak söz konusu hücrelere verilen sertlik degradelerinin gücü ve yönünün manipülasyonu. Ayrıca, mikropipetin şekli ve boyutları veya uygulanan degradenin göreceli konumu, yerleşimi ve yönü gibi tayın ayrıntılarını ve parametrelerini ince ayarlayarak, hassas hücre tipi ve sistemi. Bu parametreler, uygulanan uyaranları güvenilir bir şekilde değiştirmek ve talın işlevselliğini ve çok yönlülüğünü genişletmek için değiştirilebilir. Bu yöntem, değişen sertliğe yanıt olarak hem uzun süreli durotaktik hareketin hem de hücresel sinyalizasyon ve morfolojik dinamiklerde daha acil değişikliklerin incelenmesini sağlar.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved