Abstract
Developmental Biology
Den optimale tidspunktet for Intracytoplasmatisk sperm injeksjon (ICSI) er av en alvorlig bekymring for fruktbarhet programmer fordi ubeleilig sperm oppføring avtar egget er utviklingsmessige kompetanse. Tilstedeværelsen av den første Polar kroppen (PB) sammen med meiotic spindelen indikerer fullføring av oocyte modning og egget er beredskap for befruktning. I klinisk praksis er det vanlig å anta at alle oocytter som viser en PB er modne metafase (MII) oocytter. Men, PB ekstrudering forut dannelsen av bipolar MII spindel. Dette asynchrony gjør bare tilstedeværelsen av PB en upålitelig markør av oocyte modenhet. Ikke-invasiv spindel avbildning ved hjelp av polarisert lys mikroskopi (PLM) gir rask og enkel inspeksjon av om PB-visning oocyte faktisk satt sammen igjen en meiotic spindel før ICSI. Her presenterer vi en standard protokoll for å utføre menneskelige egg modenhet vurdering i klinisk laboratorium. Vi viser også hvordan du optimaliserer tiden for ICSI med hensyn til oocyte utviklingstrinn for å hindre prematur sperm injeksjon av sen-modning oocytter. Ved hjelp av denne tilnærmingen, kan selv umodne oocytter ekstrudering PB in vitro være klinisk utnyttet. Bekreftelse på at MII spindel er til stede før sperm injeksjon og individuell justering av tiden av ICSI er spesielt viktig i dårlig prognose in-vitro befruktning (IVF) sykluser med et lavt antall oocytter tilgjengelig for befruktning.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved