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Abstract

Medicine

生成心室样HiPSC衍生的心肌细胞和用于钙处理特征的高质量细胞制剂

Published: January 17th, 2020

DOI:

10.3791/60135

1Cardiovascular Research Center, Icahn School of Medicine at Mount Sinai

Abstract

人类诱导多能干细胞衍生心肌细胞(iPSC-CMs)为研究钙(Ca2+)处理和信号通路以及高通量药物筛选和毒性检测的基本科学提供了宝贵的人类来源。在此,我们详细介绍了用于生成高质量 iPSC-CM 的方法,这些方法可以持续再现不同细胞系的分子和功能特征。此外,还介绍了一种方法,通过评估 Ca2+处理特性,可靠地评估其功能特性。低氧 (O2) 条件、 乳酸盐选择和长时间培养产生高纯度和高质量的心室状心肌细胞.与分离的成年大鼠心肌细胞 (ARCMs) 类似,3 个月大的 iPSC-CM 表现出更高的 Ca2+振幅、更快的 Ca2+再摄取率(衰变-tau),以及与第 30 天 iPSC-CM 相比,对 β-肾上腺素刺激的正热性反应。该策略在技术上简单、经济高效且可重现。它为心脏病建模和针对Ca2+处理蛋白的大规模药物筛查提供了一个强大的平台。

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