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Medicine

एक Porcin Corneal Endothelial अंग संस्कृति मॉडल विभाजन Corneal बटन का उपयोग

Published: October 6th, 2019

DOI:

10.3791/60171

1Department of Ophthalmology, University Medical Center Hamburg-Eppendorf (UKE), 2University Eye Hospital, Center For Ophthalmology, University Hospital Tübingen

Abstract

कॉर्निया endothelial कोशिकाओं पर प्रायोगिक अनुसंधान कई कठिनाइयों के साथ जुड़ा हुआ है. मानव दाता कॉर्निया दुर्लभ हैं और प्रयोगात्मक जांच के लिए शायद ही कभी उपलब्ध के रूप में वे सामान्य रूप से प्रत्यारोपण के लिए आवश्यक हैं. Endothelial सेल संस्कृतियों अक्सर अच्छी तरह से vivo स्थितियों में अनुवाद नहीं है. गैर-मानव कॉर्निया की जैव संरचनात्मक विशेषताओं के कारण, खेती के दौरान स्ट्रॉमल सूजन पर्याप्त कॉर्निया एंडोथेलियल सेल हानि लाती है, जिससे एक विस्तारित अवधि के लिए खेती करना मुश्किल हो जाता है। डेक्सट्रन जैसे डेवेलिंग एजेंटों का उपयोग इस प्रतिक्रिया को प्रतिक्रिया करने के लिए किया जाता है। हालांकि, वे भी महत्वपूर्ण endothelial सेल हानि का कारण. इसलिए, एक पूर्व vivo अंग संस्कृति मॉडल desining एजेंटों की आवश्यकता नहीं स्थापित किया गया था. एक स्थानीय कसाईखाना से सुअर आँखें विभाजित कॉर्निया बटन तैयार करने के लिए इस्तेमाल किया गया. आंशिक कॉर्निया ट्रेफिकेशन के बाद, कॉर्निया (एपिथेलियम, बोमन परत, स्ट्रोमा के कुछ हिस्सों) की बाहरी परतों को हटा दिया गया था। यह काफी लंबे समय तक खेती की अवधि के दौरान बड़े पैमाने पर स्ट्रॉमल सूजन और Descemet की झिल्ली तह द्वारा प्रेरित corneal endothelial सेल नुकसान कम कर देता है और endothelial सेल परत के सामान्य संरक्षण में सुधार. इसके बाद पूर्ण कॉर्निया ट्रेफिकेशन के बाद शेष नेत्र बल्ब और खेती से विभाजित कॉर्निया बटन को हटा दिया गया। एंडोथेलियल सेल घनत्व को तैयार करने के बाद 15 दिनों के अनुवर्ती समय पर मूल्यांकन किया गया था (यानी, दिन 1, 8, 15) प्रकाश माइक्रोस्कोपी का उपयोग करते हुए। तैयारी तकनीक का इस्तेमाल किया endothelial सेल परत कम stromal ऊतक सूजन द्वारा सक्षम का एक बेहतर संरक्षण की अनुमति देता है, जो मानव दाता कॉर्निया के लिए तुलनीय विभाजन कॉर्निया बटन में धीमी और रैखिक गिरावट दर में परिणाम. के रूप में इस मानकीकृत organo आम तौर पर पहली बार के लिए खेती अनुसंधान मॉडल कम से कम दो सप्ताह के लिए एक स्थिर खेती की अनुमति देता है, यह मानव दाता corneas के लिए विभिन्न बाहरी कारकों के भविष्य की जांच के लिए एक मूल्यवान विकल्प के साथ संबंध है उनके संबंध कॉर्निया एंडोथेलियम पर प्रभाव.

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