לכידת לייזר פרוטוקול מיקרודיסקציה התשואות באיכות גבוהה RNA מ-העכבר קפואים טרי-קפוא

התשואה והיושרה של RNA הם המכריע עבור ניתוח RNA. עם זאת, היא לעתים קרובות מאתגרת לשמור על שלמות RNA לאורך כל לכידת הלייזר (LCM) ההליך. מאז מחקרים LCM עבודה עם כמויות נמוכות של חומר, חששות בנוגע לתשואות RNA מוגבל הם גם חשובים. לכן, פרוטוקול LCM פותחה כדי להשיג כמות מספקת של RNA באיכות גבוהה עבור ניתוח ביטוי גנים בתאי עצם. ההשפעה של הפרוטוקול כתמים, עובי של קריודורים, כמות רקמת מיקרו, הוצאת RNA ערכת, ו LCM מערכת בשימוש על התשואה RNA ויושרה המתקבל מתאי עצם מיקרוגזור הוערך. שמונה-μm-עבה מפרקי עצם קפואים נעשו באמצעות סרט דביק מוכתם באמצעות פרוטוקול מהיר עבור כתם LCM מסחרי. המדגם היה דחוקה בין קרום פוליאתילן terאפרון (PET) ממברנה הסרט דבק. מערכת LCM המשתמשת בכוח הכבידה עבור אוסף דגימות ושיטת החילוץ של RNA המבוסס על עמודה שימשו כדי להשיג RNAs באיכות גבוהה של תשואה מספקת. המחקר הנוכחי מתמקד על מקטעי עצם הירך העכבר. עם זאת, פרוטוקול LCM דווח כאן ניתן להשתמש כדי ללמוד ביטוי גנים באתרו בתאים של כל רקמה קשה הן בתנאים פיסיולוגיים ותהליכי המחלה.