Evaluación de la capacidad de diferenciación de las células epiteliales de próstata de ratón utilizando el cultivo organoide

El epitelio prostático se compone predominantemente de células basales y luminales. El trazado de linaje in vivo se ha utilizado para definir la capacidad de diferenciación de las células basales y luminales de la próstata del ratón durante el desarrollo, la regeneración de tejidos y la transformación. Sin embargo, evaluar los reguladores celulares-intrínsecos y extrínsecos de la capacidad de diferenciación epitelial de próstata utilizando un enfoque de trazado de linaje a menudo requiere una amplia reproducción y puede ser prohibitivo para los costos. En el ensayo organoide prostático, las células basales y luminales generan epitelio prostático ex vivo. Es importante destacar que las células epiteliales primarias pueden aislarse de ratones de cualquier origen genético o ratones tratados con cualquier número de moléculas pequeñas antes o después del cultivo tridimensional (3D). Se genera material suficiente para la evaluación de la capacidad de diferenciación después de 7-10 días. Colección de organoides derivados basales y de origen luminal para (1) análisis de proteínas por western blot y (2) análisis inmunohistoquímico de organoides intactos mediante microscopía confocal de montaje completo permite a los investigadores evaluar la diferenciación ex vivo capacidad de las células epiteliales de próstata. Cuando se utilizan en combinación, estos dos enfoques proporcionan información complementaria sobre la capacidad de diferenciación de las células basales y luminales de la próstata en respuesta a la manipulación genética o farmacológica.