Caracterização dos efeitos de inibidores de Migrastatic na invasão do spheroid do tumor 3D pela microscopia confocal de alta resolução

Descoberta de drogas e desenvolvimento em pesquisa de câncer está sendo cada vez mais baseado em telas de drogas em um formato 3D. Os inibidores novos que visam o potencial migratório e invasor de pilhas de cancro, e conseqüentemente a propagação metastática da doença, estão sendo descobertos e considerados como tratamentos complementares em cancros altamente invasores tais como gliomas. Assim, é necessário gerar dados que permitam a análise detalhada das células em um ambiente 3D após a adição de uma droga. A metodologia descrita aqui, combinando ensaios de invasão esferóide com captura de imagem de alta resolução e análise de dados por microscopia de varredura por laser confocal (CLSM), permitiu a caracterização detalhada dos efeitos do potencial inibidor antimigratório MI-192 em células de glioma. Os spheroids foram gerados das linhas de pilha para ensaios da invasão em placas 96-well aderentes baixas e preparadas então para a análise de CLSM. O fluxo de trabalho descrito foi preferível em relação a outras técnicas geradoras de spheroóides comumente usadas, devido à facilidade e reprodutibilidade. Isto, combinado com a definição aumentada da imagem alcançada pela microscopia confocal comparada às aproximações convencionais do largo-campo, permitiu a identificação e a análise de mudanças morfológicas distintas em pilhas migratórias em um ambiente 3D que segue tratamento com a droga migrastatic MI-192.