在五个脊椎动物群中可靠隔离中枢神经系统微血管

从中枢神经系统 （CNS） 分离微血管通常通过结合多只动物（最常见的是啮齿动物）的皮质组织来执行。这种方法将血脑屏障（BBB）特性的询问限制在皮层，不允许进行个体比较。该项目的重点是开发一种隔离方法，允许比较来自多个中枢神经系统区域的神经血管单元（NVU）：皮层、小脑、视叶、下丘脑、脑干和脊髓。此外，最初为鼠类样本开发的这个方案被成功应用于中小脊椎动物的CNS组织，从中我们也能够从大脑半球白质中分离微血管。当与免疫标记配对时，该方法允许对蛋白质表达进行定量，并在个体、组织类型或治疗之间进行统计比较。通过评估实验性自身免疫性脑脊髓炎 （EAE） 期间蛋白质表达的变化，我们证明了这种适用性，这是神经炎疾病多发性硬化症的一种小鼠模型。此外，通过这种方法分离的微容器可用于下游应用，如qPCR、RNA-seq和西体斑点等。尽管这不是第一次尝试在不使用超离心或酶分离的情况下分离CNS微容器，但它在单一个体和多个CNS区域的比较方面的独特之处。因此，它允许调查一系列差异，否则可能仍然模糊： 中枢神经系统部分 （皮质， 小脑， 视叶， 脑干， 下丘脑， 脑垂体， 和脊髓）， CNS 组织类型 （灰色或白色物质）， 个人，实验性治疗组和物种。