JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Abstract

Immunology and Infection

جيل من المتحولين في الإطار الجينات الحذف في الزائفة الزنجاريه واختبار لتوهين ضراوة في نموذج الماوس بسيطه من العدوى

Published: January 8th, 2020

DOI:

10.3791/60297

1Progenesis Technologies, LLC, 2Department of Biomedical Sciences, Pediatrics, Joan C. Edwards School of Medicine at Marshall University

Abstract

الكائنات المجهرية هي متعددة الأغراض وراثيا ومتنوعة وأصبحت مصدرا رئيسيا للعديد من المنتجات التجارية والbiopharmaceuticals. علي الرغم من ان بعض هذه المنتجات تنتج بشكل طبيعي من قبل الكائنات الحية ، والمنتجات الأخرى تتطلب الهندسة الوراثية للكائن الحي لزيادة غله الإنتاج. سلالات خبيثه من القولونية كانت تقليديا الأنواع البكتيرية المفضلة لإنتاج biopharmaceuticals; ومع ذلك ، بعض المنتجات من الصعب علي e. كولاي لإنتاج. وهكذا ، فان السلالات الخبيثة من الأنواع البكتيرية الأخرى يمكن ان توفر بدائل مفيده لإنتاج بعض المنتجات التجارية. الزائفة الزنجاريه هي بكتيريا سلبيه الجرام المشتركة ومدروسه جيدا التي يمكن ان توفر بديلا مناسبا ل e. كولاي. ومع ذلك ، الزنجاريه هو الممرض البشري الانتهازي. هنا ، ونحن التفاصيل الإجراءات التي يمكن استخدامها لتوليد سلالات غير المسببة للامراض من الزنجاريه من خلال الحذف الجيني متسلسلة باستخدام Plasmid pEX100T نؤتي. والميزة الرئيسية لهذه الطريقة هي إنتاج سلاله خاليه من العلامات. ويمكن استخدام هذه الطريقة لتوليد سلالات الزنجاريه موهنه للغاية لإنتاج المنتجات التجارية ، أو لتصميم سلالات لاستخدامات محدده أخرى. ونحن أيضا وصف نموذج الماوس بسيطه واستنساخه من العدوى الجهازية البكتيرية عن طريق حقن داخل الصفاق من سلالات اختبار المصادق عليها لاختبار التوهين من سلاله المهندسة وراثيا بالمقارنة مع سلاله BL21 المعتمدة من قبل FDA من e. كولاي.

Explore More Videos

155

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved