在伪单体中生成帧内基因删除突变体，并在简单小鼠感染模型中测试病毒衰减

微生物具有遗传多样性和多样性，已成为许多商业产品和生物制药的主要来源。虽然其中一些产品是有机体自然生产的，但其他产品需要生物体的遗传工程来提高产量。大肠杆菌的阿维性菌株历来是生产生物制药的首选细菌品种;然而，有些产品很难生产大肠杆菌。因此，其他细菌物种的阿维规则菌株可以为生产某些商业产品提供有用的替代品。假单抗是一种常见且经过深入研究的革兰氏阴性细菌，可提供大肠杆菌的合适替代品。然而，阿鲁吉诺萨是一种机会性人类病原体。在这里，我们详细介绍了一个程序，可用于通过使用pEX100T-NotI质粒通过顺序基因组删除来生成P.aeruginosa的非致病菌株。此方法的主要优点是产生无标记应变。该方法可用于生成用于生产商业产品的高衰减P. aeruginosa菌株，或为其他特定用途设计菌株。我们还描述了一个简单和可重复的小鼠模型细菌系统感染通过腹内注射经验证的测试菌株，以测试基因工程菌株的衰减相比，FDA批准的BL21菌株的大肠杆菌。