Sistema de Microinyección para Infusión Combinada de Drogas y Electrofisiología

Este sistema de microinyección está diseñado para la infusión de fármacos, la electrofisiología y la entrega y recuperación de sondas experimentales, como microelectrodos y nanosensores, optimizados para su uso repetido en animales despiertos y comportándose. El sistema de microinyección se puede configurar para múltiples propósitos: (1) disposición simple de la cánula para la colocación de una sonda experimental que de otro modo sería demasiado frágil para penetrar en la dura mater, (2) infusión microfluica de un medicamento, ya sea de forma independiente o acoplada a una cánula que contenga una sonda experimental (es decir, microelectrodo, nanosensor). En este protocolo explicamos la construcción paso a paso del microinyectador, su acoplamiento a componentes microfluídicos, y el protocolo para el uso del sistema in vivo. Los componentes microfluídicos de este sistema permiten la entrega de volúmenes en la escala de nanolitros, con un daño de penetración mínimo. La infusión de fármacos se puede realizar de forma independiente o simultánea con sondas experimentales como microelectrodos o nanosensores en un animal despierto y que se comporta. Las aplicaciones de este sistema van desde medir los efectos de un fármaco en la actividad eléctrica cortical y el comportamiento, hasta la comprensión de la función de una región específica de la corteza en el contexto del rendimiento conductual basado en mediciones de sonda o nanosensor. Para demostrar algunas de las capacidades de este sistema, presentamos un ejemplo de infusión de muscimol para la inactivación reversible del campo ocular frontal (FEF) en macaco rhesus durante una tarea de memoria de trabajo.