Måle fagocytose av Aspergillus fumigatus Conidia av menneskelige leukocytter bruker Flow flowcytometri

Invasiv lungeinfeksjon av mold Aspergillus fumigatus utgjør en stor trussel mot immunsupprimerte pasienter. Inhalert fungal conidia (sporer) er ryddet fra den menneskelige lunge alveoler ved å være phagocytosed av medfødte monocytter og/eller nøytrofile. Denne protokollen gir en rask og pålitelig måling av fagocytose ved å flyte flowcytometri ved hjelp av fluorescein isothiocyanate (FITC)-merket conidia for co-inkubasjons med menneskelige leukocytter og påfølgende counterstaining med et anti-FITC antistoff for å tillate diskriminering av internalisert og celle-tilhenger conidia. Store fordeler av denne protokollen er dens rapidness, muligheten til å kombinere analysen med analytiske analyse av andre celle markører av interesse, samtidig analyse av monocytter og nøytrofile fra en enkelt prøve og dens anvendelighet til andre cellevegg-bærende sopp eller bakterier. Fastsettelse av prosenter av phagocytosing leukocytter gir et middel til å mikrobiologer for å evaluere virulens av en patogen eller for å sammenligne patogen wildtypes og mutanter samt å immunologer for å undersøke menneskelig leukocytter evner å bekjempe patogener.