Subcellulære Fraksjonering av primær kronisk lymfatisk leukemi celler til å overvåke kjernefysisk/cytoplasmatiske protein smugling

Kjernefysisk eksport av makromolekyler er ofte deregulerte i kreftceller. Tumor Suppressor proteiner, slik som p53, kan gjengis inaktive på grunn av avvikende mobilnettet lokalisering forstyrre deres virkningsmekanisme. Overlevelse av kronisk lymfatisk leukemi (CLL) celler, blant andre kreftceller, er assistert av dereguleringen av kjernefysiske til cytoplasmatiske skytteltrafikk, i hvert fall delvis gjennom dereguleringen av transport reseptor XPO1 og konstituerende aktivering av PI3K-mediert signal veier. Det er viktig å forstå rollen til individuelle proteiner i sammenheng med deres intracellulære plassering for å få en dypere forståelse av rollen til slike proteiner i pathobiology av sykdommen. Videre, identifisere prosesser som ligger til grunn celle stimulering og virkningsmekanismen av spesifikke farmakologiske hemmere, i sammenheng med subcellulære protein smugling, vil gi en mer helhetlig forståelse av mekanismen av Handling. Protokollen er beskrevet her muliggjør optimalisering og påfølgende effektiv generering av kjernefysiske og cytoplasmatiske fraksjoner fra primære kroniske lymfatisk leukemi celler. Disse fraksjonene kan brukes til å bestemme endringer i protein smugling mellom kjernefysiske og cytoplasmatiske fraksjoner på celle stimulering og narkotikabehandling. Dataene kan bli kvantifisert og presentert parallelt med immunofluorescent bilder, og dermed gi robuste og målbare data.