Fluorescensaktiverad cellsortering för isolering av scleractinian cell populationer

Korallrev hotas på grund av antropogena stressfaktorer. Den biologiska reaktionen av korall till dessa stressfaktorer kan uppstå på cellnivå, men mekanismerna är inte väl förstådda. För att undersöka korall svar på stressfaktorer, vi behöver verktyg för att analysera cellulära svar. Framför allt behöver vi verktyg som underlättar tillämpningen av funktionella analyser för att bättre förstå hur cellpopulationer reagerar på stress. I den aktuella studien använder vi fluorescensaktiverad cellsortering (FACS) för att isolera och separera olika cellpopulationer i steniga koraller. Detta protokoll innehåller: (1) separation av korallvävnader från skelettet, (2) skapandet av en enda cell suspension, (3) märkning korallcellerna med hjälp av olika markörer för flöde cytometri, och (4) gating och cell sortering strategier. Denna metod kommer att göra det möjligt för forskare att arbeta med koraller på cellnivå för analys, funktionella analyser och genuttrycksstudier av olika cellpopulationer.