毛因神经发生期间诺奇信号动力学的实时生物发光成像

Notch信号通过细胞-细胞相互作用调节神经干细胞/祖细胞的维持。Notch 信令的组件表现出动态表达式。槽口信号效应器 Hes1 和 Notch 配体增量类似 1 （Dll1） 在神经茎/祖细胞中以振荡方式表示。由于这些基因的振荡表达周期很短（2小时），因此很难监测它们的循环表达。为了检查基因表达或蛋白质动力学的这种快速变化，需要快速响应报告器。由于其快速成熟动力学和高灵敏度，生物发光报明酶适用于监测活细胞中快速的基因表达变化。我们使用不稳定的荧光素酶报告器来监测促进者活动，使用荧光素酶融合报告器在单个细胞分辨率下可视化蛋白质动力学。这些生物发光记者显示快速周转，并产生非常微弱的信号;因此，我们开发了一个高度敏感的生物发光成像系统来检测这种微弱的信号。这些方法使我们能够监测活细胞和组织的各种基因表达动力学，这是帮助了解实际细胞状态的重要信息。