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Immunology and Infection

Méthodes de culture pour déterminer la limite de détection et de survie dans les médias de transport de Campylobacter Jejuni dans les spécimens fécals humains

Published: March 10th, 2020

DOI:

10.3791/60457

1TECHLAB, Inc.

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Une culture des selles humaines pour le diagnostic de la maladie intestinale basée sur Campylobacterprend plusieurs jours, une attente qui taxe le courage du médecin et du patient. Une culture est également sujette à de faux résultats négatifs de la perte aléatoire de viabilité lors de la manipulation des spécimens, de la prolifération d’autres espèces fécales et de la faible croissance de plusieurs espèces pathogènes campylobacter sur les médias traditionnels. Ces problèmes peuvent confondre les décisions cliniques sur le traitement des patients et ont limité le domaine de répondre à des questions fondamentales sur la croissance campylobacter et les infections. Nous décrivons une procédure qui estime la limite inférieure des nombres bactériens qui peuvent être détectés par une culture et une méthode pour quantifier la survie de C. jejuni dans les médias utilisés pour le transport de cet organisme fragile. Connaissant cette information, il devient possible d’établir des seuils de détection cliniquement pertinents pour les tests diagnostiques et de traiter les questions non étudiées de savoir si la colonisation non symptomatique est répandue, si la co-infection avec d’autres agents pathogènes entériques est commune, ou si la charge bactérienne est corrélée avec des symptômes ou des séquelles graves. L’étude a également inclus l’essai de 1.552 spécimens fécaux diarrhéiques de patient prospectivement rassemblés qui ont été initialement classifiés par la culture conventionnelle et davantage examinés par une nouvelle immunoassay d’enzyme. Les spécimens positifs et disrepants ont ensuite été examinés par quatre méthodes moléculaires pour attribuer un statut vrai-positif ou vrai négatif. Les 5 méthodes non culturelles ont montré un accord complet sur les 48 spécimens positifs et disrepants, tandis que la culture a mal identifié 14 (28 %). Les spécimens qui ont été incorrectement identifiés par la culture comprenaient 13 faux négatifs et 1 faux échantillon positif. Ce protocole de base peut être utilisé avec plusieurs campylobacter spp. et permettra de déterminer le nombre de bactéries Campylobacter qui produisent des symptômes de gastro-entérite chez l’homme et de mettre à jour les taux de prévalence.

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