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Abstract

Neuroscience

遗传性痉挛性截瘫中人类诱导多能干细胞衍生神经元的线粒体迁移与形态分析

Published: February 9th, 2020

DOI:

10.3791/60548

1Department of Biomedical Sciences, University of Illinois College of Medicine Rockford, 2Department of Bioengineering, University of Illinois at Chicago, 3MD Program, University of Illinois College of Medicine Rockford

Abstract

神经元对高能量有强烈的需求,以支持其功能。在人类神经元中观察到沿着斧子的线粒体传输受损,这可能导致各种疾病状态的神经退化。虽然研究活人类神经中的线粒体动力学具有挑战性,但这种模式对于研究线粒体在神经退化中的作用至关重要。本文介绍一个协议,用于分析前脑神经元的线粒体迁移和线粒体形态学,该词从人类诱导多能干细胞(iPSCs)中提取。iPSCs 使用成熟的方法分化为端脑谷氨酸神经元。神经元的线粒体被MitoTracker CMXRos染色,并且使用装有细胞培养箱的活细胞成像显微镜捕获斧子内的线粒体运动。使用带有"多Kymograph"、"生物格式导入器"和"宏"插件的软件对延时图像进行分析。生成线粒体传输的线粒体图,并从测速仪中读取反逆向线粒体的平均线粒体速度。在线粒体形态分析方面,利用ImageJ获得线粒体长度、面积和纵横比。总之,该协议允许沿斧子对线粒体贩运进行表征,并分析其形态,以促进神经退行性疾病的研究。

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