במודל עכבר Vivo של זיהום שתל בעמוד השדרה

זיהומים בשתלי עמוד השדרה מבשרים תוצאות גרועות מכיוון שהאבחון מאתגר ומיגור כירורגי מנוגד ליציבות המכנית של עמוד השדרה. מטרת שיטה זו היא לתאר מודל עכברי חדשני של זיהום שתל עמוד השדרה (SII) שנוצר כדי לספק כלי invivo זול, מהיר ומדויק לבדיקת טיפולים פוטנציאליים ואסטרטגיות טיפול בזיהומים של שתלי עמוד השדרה.

בשיטה זו, אנו מציגים מודל של ניתוחי עמוד שדרה בגישה אחורית שבו חוט k מפלדת אל-חלד מועתק לתהליך עמוד השדרה L4 של עכברי בר בני 12 שבועות מסוג C57BL/6J ומחוסן ב-1 x 10³ CFU של זן ביולומינסנטי של חיידקי Staphylococcus aureus Xen36. לאחר מכן עכברים מצולמים לאורך, עבור bioluminescence in vivo בימים 0, 1, 3, 5, 7, 10, 14, 18, 21, 25, 28 ו-35. אותות דימות ביולומינסנציה (BLI) משדה ראייה סטנדרטי מכומתים כדי למדוד עומס חיידקי in vivo.

כדי לכמת חיידקים הנצמדים לשתלים ולרקמה הפרי-שתלית, ממיתים עכברים וקוצרים את השתל ואת הרקמה הרכה שמסביבו. חיידקים מנותקים מהשתל על ידי סוניקציה, מתורבתים במשך הלילה ולאחר מכן יחידות יוצרות מושבה (CFUs) נספרות. התוצאות המתקבלות משיטה זו כוללות ספירות חיידקים אורכיות כפי שנמדדו על ידי in vivo S. aureus bioluminescence (שטף מרבי ממוצע) וספירות CFU לאחר המתת חסד.

בעוד שמודלים קודמים של בעלי חיים של זיהום מכשור בעמוד השדרה כללו ניתוח פולשני של רקמות ex vivo, מודל העכבר של מכון התקנים המוצג במאמר זה ממנף הדמיה אופטית לא פולשנית בזמן אמת in vivo של חיידקים ביולומינסנטיים כדי להחליף מחקר רקמות סטטיות. היישומים של המודל הם רחבים ועשויים לכלול שימוש בזני חיידקים ביולומינסנטיים חלופיים, שילוב סוגים אחרים של עכברים מהונדסים גנטית כדי לחקור בו זמנית את התגובה החיסונית של המאכסן, והערכת שיטות אבחון וטיפול חדשות או חקירה כגון אנטיביוטיקה או ציפויי שתלים.