Flerdimensionale Coculture System til Model Lung Planocellualt Karcinom Progression

Tumor-stroma interaktioner spiller en afgørende rolle i udviklingen af lunge planocelluøs karcinom (LUSC). Men, forstå, hvordan disse dynamiske interaktioner bidrage til væv arkitektoniske ændringer observeret under tumorigenesis fortsat udfordrende på grund af manglen på passende modeller. I denne protokol beskriver vi genereringen af en 3D-coculture-model ved hjælp af en LUSC primærcellekultur kendt som TUM622. TUM622 celler blev etableret fra en LUSC patient-afledt xenograft (PDX) og har den unikke egenskab til at danne acinar-lignende strukturer, når seedet i en kælder membran matrix. Vi viser, at TUM622 acini i 3D-kokultur opsummerer de vigtigste elementer i vævsarkitekturunder LUSC-progression samt de dynamiske interaktioner mellem LUSC-celler og komponenter i tumormikromiljøet (TME), herunder det ekstracellulære (ECM) og kræftrelaterede fibroblaster (CAF'er). Vi yderligere tilpasse vores vigtigste 3D dyrkning protokol for at vise, hvordan dette system kan udnyttes til forskellige downstream analyser. Samlet set skaber denne organoidmodel en biologisk rig og fleksibel platform, der gør det muligt for en at få indsigt i de celleiboende og ydre mekanismer, der fremmer afbrydelsen af epitelarkitekturer under karcinomprogression og vil hjælpe søgen efter nye terapeutiske mål og diagnostiske markører.