Induktion af Eryptose i røde blodlegemer ved hjælp af en calcium Ionophore

Eryptose, erythrocyt programmeret celledød, forekommer i en række hæmatologiske sygdomme og under skade på erythrocytter. Et kendetegn for eryptotiske celler er tabet af kompositoriske asymmetri af cellemembranen, hvilket fører til translokation af phosphatidylserin til membranens ydre folder. Denne proces udløses af øget intracellulær koncentration af ca^{2 +}, som aktiverer scramblase, et enzym, der letter tovejs bevægelse af phospholipider mellem membran foldere. I betragtning af eryptose betydning i forskellige sygdomstilstande, har der været bestræbelser på at inducere eryptose in vitro. Sådanne bestræbelser har generelt påberåbt sig calcium ionophore, ionomycin, at øge intracellulær ca^{2 +} koncentration og inducere eryptose. Men, mange uoverensstemmelser er blevet rapporteret i litteraturen om proceduren for inducerende eryptosis ved hjælp af ionomycin. Heri rapporterer vi en trin-for-trin-protokol for ionomycin-induceret eryptose i humane erythrocytter. Vi fokuserer på vigtige trin i proceduren, herunder ionophor koncentration, inkubationstid, og glukose udtømning, og give repræsentative resultat. Denne protokol kan anvendes til reproducerbart at inducere eryptose i laboratoriet.