JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Abstract

Chemistry

स्थिर धातु एफ़िनिटी क्रोमेटोग्राफी में धातु लीचिंग का परिमाणीकरण

Published: January 17th, 2020

DOI:

10.3791/60690

1Department of Chemistry and Biochemistry, James Madison University, 2Biophysics Graduate Program, Ohio State University

Abstract

स्थिर धातु एफ़िनिटी क्रोमेटोग्राफी (आईमैक) स्तंभों से लीच धातुओं के साथ एंजाइमों का संदूषण एंजाइमों के लिए एक बड़ी चिंता का विषय बन गया है, क्योंकि आईमैक रेजिन में उपयोग किए जाने वाले कई आम डी-और ट्राइवेलेंट कॉइन एंजाइमों पर अवरोधक प्रभाव डालते हैं। हालांकि, धातु लीचिंग की सीमा और विभिन्न eluting के प्रभाव और अभिकर्मकों को कम करने के लिए सरल और व्यावहारिक संक्रमण धातु क्वांटिफिकेशन प्रोटोकॉल है कि आम तौर पर उपलब्ध उपकरणों का उपयोग की अनुपस्थिति के कारण बड़े हिस्से में खराब समझ रहे है बायोकेमिस्ट्री लैब। इस समस्या के समाधान के लिए, हमने एक शुद्धि कदम के रूप में आईमैक का उपयोग करके तैयार नमूनों में धातु संदूषण की मात्रा को जल्दी से निर्धारित करने के लिए एक प्रोटोकॉल विकसित किया है। विधि 647 एनएम पर एचएनबी स्पेक्ट्रम में परिवर्तन के आधार पर, नैनोमोलर रेंज में धातु की मात्रा की मात्रा निर्धारित करने के साधन के रूप में एक नमूना समाधान में धातु cation सामग्री के लिए एक रंगीन संकेतक के रूप में हाइड्रोक्सीनैपथॉल ब्लू (एचएनबी) का उपयोग करती है। जबकि एक समाधान में धातु सामग्री ऐतिहासिक रूप से परमाणु अवशोषण स्पेक्ट्रोस्कोपी या प्रेरक प्लाज्मा तकनीकों का उपयोग करके निर्धारित की गई है, इन तरीकों को एक विशिष्ट जैव रसायन प्रयोगशाला के दायरे के बाहर विशेष उपकरण और प्रशिक्षण की आवश्यकता होती है। यहां प्रस्तावित विधि बायोकेमिस्टों के लिए सटीकता का त्याग किए बिना मौजूदा उपकरणों और ज्ञान का उपयोग करके नमूनों की धातु सामग्री निर्धारित करने के लिए एक सरल और तेज तरीका प्रदान करती है।

Explore More Videos

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved