Souris NOG humanisées pour l'exposition intravaginale au VIH et le traitement de l'infection par le VIH

Les souris humanisées fournissent une plate-forme sophistiquée pour étudier la virologie du virus de l'immunodéficience humaine (VIH) et pour tester les médicaments antiviraux. Ce protocole décrit l'établissement d'un système immunitaire humain chez les souris adultes NOG. Ici, nous expliquons toutes les étapes pratiques de l'isolement des cellules CD34 de Sang de cordon ombilical dérivées de CD34 Et de leur transplantation intraveineuse subséquente chez les souris, à la manipulation du modèle par l'infection par le VIH, thérapie antirétrovirale combinée ( cART), et l'échantillonnage de sang. Environ 75 000 cellules hCD34 sont injectées par voie intraveineuse chez les souris et le niveau de chimérisme humain, également connu sous le nom d'humanisation, dans le sang périphérique est estimé longitudinalement pendant des mois par cytométrie de flux. Au total, 75 000 cellules hCD34MD génèrent des cellules CD45 MD humaines de 20 % à 50 % dans le sang périphérique. Les souris sont sensibles à l'infection intravaginale par le VIH et le sang peut être échantillonné une fois par semaine pour l'analyse, et deux fois par mois pendant de longues périodes. Ce protocole décrit un analyse pour la quantification de la charge virale plasmatique à l'aide de gouttelettes PCR numérique (ddPCR). Nous montrons comment les souris peuvent être traitées efficacement avec un régime standard de soins de cART dans l'alimentation. La livraison de cART sous la forme de chow souris régulière est un raffinement significatif du modèle expérimental. Ce modèle peut être utilisé pour l'analyse préclinique des composés de prophylaxie pré-exposition systémiques et topiques ainsi que pour le dépistage de nouveaux traitements et stratégies de guérison du VIH.