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Abstract

Biology

LarvaSPA,一种用于长期延时成像的安装果蝇幼虫的方法

Published: February 27th, 2020

DOI:

10.3791/60792

1Weill Institute for Cell and Molecular Biology and Department of Molecular Biology and Genetics, Cornell University

Abstract

活成像是研究细胞生物学问题的宝贵方法。果蝇幼虫特别适合体内活体成像,因为幼虫体壁和大多数内部器官是透明的。然而,对完整果蝇幼虫进行超过30分钟的连续活成像一直具有挑战性,因为长期以来很难非侵入性的防活动幼虫。在这里,我们提出了一种称为LarvaSPA的幼虫安装方法,它允许对具有高时空分辨率的活果蝇幼虫进行连续成像,时间及空间分辨率超过10小时。此方法涉及使用紫外线反应胶将幼虫部分附着在盖玻片上,并使用聚二甲基硅氧烷 (PDMS) 块额外限制幼虫运动。该方法与处于发育阶段的幼虫相容,从第二星到游荡第三星。我们演示了这种方法在研究果蝇体细胞感觉神经元的动态过程中的应用,包括树突生长和损伤引起的树突退化。该方法还可用于研究在幼虫体壁附近发生的许多其他细胞过程。

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