क्रोमाग्नोन का उपयोग करके सुपर-रिज़ॉल्यूशन बायोलॉजिकल इमेजिंग के युग में 3डी रंगीन बदलावों का उच्च सटीकता सुधार

मात्रात्मक मल्टीकलर फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी विभिन्न तरंगदैर्ध्य पर अधिग्रहीत रंग चैनलों के सावधान स्थानिक मिलान पर निर्भर करता है। रंगीन विचलन और कैमरों के अपूर्ण संरेखण के कारण, प्रत्येक चैनल में अधिग्रहीत छवियों को स्थानांतरित किया जा सकता है, और बढ़ाया जा सकता है, साथ ही तीन आयामों में से किसी में एक दूसरे के सापेक्ष घुमाया जा सकता है। शास्त्रीय अंशांकन विधि के साथ, रंगीन बदलाव ों को कवरस्लिप की सतह से जुड़े बहुरंगी मोतियों द्वारा मापा जाता है, और इस तरह के अंशांकन नमूनों से रंगीन बदलावों को मापने के लिए कई सॉफ्टवेयर उपलब्ध हैं। हालांकि, रंगीन विपथन गहराई के साथ भिन्न हो सकता है, अवलोकन स्थितियों के साथ बदल सकता है और जैविक नमूने द्वारा ही प्रेरित किया जा सकता है, इस प्रकार ब्याज के नमूने में और मात्रा में रंगीन बदलाव की सही मात्रा के निर्धारण में बाधा डालता है। उच्च सटीकता पर रंगीन बदलाव को ठीक करना सुपर-रिज़ॉल्यूशन माइक्रोस्कोपी के लिए विशेष रूप से प्रासंगिक है जहां केवल मामूली रंगीन बदलाव मात्रात्मक विश्लेषणों को प्रभावित कर सकते हैं और बहुरंगी छवियों की व्याख्या को बदल सकते हैं। हमने जैविक नमूनों में 3डी रंगीन बदलावों को मापने और सही करने के लिए एक ओपन-सोर्स सॉफ्टवेयर क्रोमाग्नोन और साथ के तरीके विकसित किए हैं। यहां हम एक विस्तृत आवेदन प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं जिसमें ब्याज के जैविक नमूनों में रंगीन बदलाव को मापने के लिए नमूना तैयार करने, डेटा अधिग्रहण और सॉफ्टवेयर प्रसंस्करण के लिए विशेष आवश्यकताएं शामिल हैं।