JoVE Logo

Sign In

Abstract

Genetics

게놈 규모 CRISPR/Cas9 유전 스크린을 이용한 세포 표면 수용체 식별

Published: June 6th, 2020

DOI:

10.3791/60803

1Cell Surface Signalling Laboratory, Wellcome Trust Sanger Institute, 2EMBL-EBI, Wellcome Genome Campus

Abstract

막 내장 된 세포 표면 수용체 사이의 직접적인 상호 작용에 의해 매개 된 세포 간 통신은 다세포 유기체의 정상적인 발달및 기능에 매우 중요합니다. 그러나 이러한 상호 작용을 감지하는 것은 기술적으로 어려운 일입니다. 이 원고는 특정 세포 표면 인식 사건에 필요한 세포 경로를 밝히는 체계적인 게놈 규모 CRISPR/Cas9 녹아웃 유전자 스크리닝 접근법을 설명합니다. 이 분석법은 포유류 단백질 발현 시스템에서 생성된 재조합 단백질을 열렬한 결합 프로브로서 세포 기반 유전자 화면에서 상호작용 파트너를 식별합니다. 이 방법은 막-임베디드 수용체의 ectodomains에 대응하는 재조합 결합 프로브에 의해 검출된 세포 표면 상호작용에 필요한 유전자를 식별하는데 사용될 수 있다. 중요한 것은, 이 접근법의 게놈 스케일 특성을 감안할 때, 또한 직접 수용체뿐만 아니라 세포 표면에서 수용체의 프리젠테이션에 필요한 세포 성분을 식별할 뿐만 아니라, 수용체의 생물학에 대한 귀중한 통찰력을 제공한다는 장점이 있다.

Explore More Videos

160

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved