Identificación del receptor de superficie celular mediante pantallas genéticas CRISPR/Cas9 de escala de genoma

La comunicación intercelular mediada por interacciones directas entre receptores de superficie celulares incrustados en membrana es crucial para el desarrollo normal y el funcionamiento de organismos multicelulares. Sin embargo, la detección de estas interacciones sigue siendo técnicamente difícil. Este manuscrito describe un enfoque sistemático de detección genética de knockout CRISPR/Cas9 a escala del genoma que revela las vías celulares necesarias para eventos específicos de reconocimiento de superficie celular. Este ensayo utiliza proteínas recombinantes producidas en un sistema de expresión de proteínas de mamíferos como ávidas sondas de unión para identificar socios de interacción en una pantalla genética basada en células. Este método se puede utilizar para identificar los genes necesarios para las interacciones de la superficie celular detectadas por sondas de unión recombinantes correspondientes a los ectodominios de los receptores incrustados en la membrana. Es importante destacar que, dada la naturaleza a escala del genoma de este enfoque, también tiene la ventaja de no sólo identificar el receptor directo, sino también los componentes celulares que se requieren para la presentación del receptor en la superficie celular, proporcionando así información valiosa sobre la biología del receptor.