Abstract
Genetics
Membrana gömülü hücre yüzey reseptörleri arasındaki doğrudan etkileşimler aracılığı ile aracılık edilen hücreler arası iletişim, çok hücreli organizmaların normal gelişimi ve işleyişi için çok önemlidir. Ancak, bu etkileşimleri algılamak teknik olarak zor olmaya devam etmektedir. Bu makale, belirli hücre yüzey tanıma olayları için gerekli hücresel yolları ortaya koyan sistematik genom ölçekli CRISPR/Cas9 nakavt genetik tarama yaklaşımını açıklamaktadır. Bu test, bir memeli protein ekspresyon sisteminde üretilen rekombinant proteinleri hücre tabanlı genetik bir ekranda etkileşim ortaklarını belirlemek için hevesli bağlayıcı problar olarak kullanır. Bu yöntem, membrana gömülü reseptörlerin ektodomains karşılık rekombinant bağlayıcı problar tarafından tespit hücre yüzeyi etkileşimleri için gerekli genleri tanımlamak için kullanılabilir. Daha da önemlisi, bu yaklaşımın genom ölçekli doğası göz önüne alındığında, aynı zamanda sadece doğrudan reseptör tespit değil, aynı zamanda hücre yüzeyinde reseptör sunumu için gerekli olan hücresel bileşenleri tespit avantajı vardır, böylece reseptörbiyolojisi içine değerli anlayışlar sağlayan.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved