Eenvoudige lithografie-vrije single cell micropatterning met behulp van Laser-Cut Stencils

Micropatroon technieken zijn op grote schaal gebruikt in de celbiologie om de effecten van het beheersen van celvorm en grootte op cel lot bepaling bij een enkele cel resolutie te bestuderen. De huidige state-of-the-art single cell micropatterning technieken omvatten zachte lithografie en micro-contact afdrukken, dat is een krachtige technologie, maar vereist getrainde technische vaardigheden en bepaalde faciliteit ondersteuning in microfabricage. Deze beperkingen vereisen een meer toegankelijke techniek. Hier beschrijven we een eenvoudige alternatieve lithografievrije methode: stencil-gebaseerde eencellige patronen. Wij bieden stapsgewijze procedures, waaronder stencilontwerp, polyacrylamidehydrogelfabricage, eiwitopname op basis van stencil en celbeplating en -cultuur. Deze eenvoudige methode kan worden gebruikt om een array van maar liefst 2.000 cellen patroon. We tonen de patronen van cardiomyocyten afgeleid van enkele door de mens geïnduceerde pluripotente stamcellen (hiPSC) met verschillende celvormen, van een 1:1 vierkant tot een 7:1 volwassen cardiomyocyte-achtige rechthoek. Deze stencil-gebaseerde eencellige patroonis lithografie-vrij, technisch robuust, handig, goedkoop, en vooral toegankelijk voor mensen met een beperkte bio-engineering achtergrond.