Live Cell Imaging von Microtubule Cytoskeleton und mikromechanische Manipulation der Arabidopsis Schießen apical Meristem

Das Verständnis der Regulierung von Wachstum und Morphogenese auf Zell- und Gewebeebene steht seit vielen Jahrzehnten an vorderster Front der biologischen Forschung. Fortschritte in molekularen und bildgebenden Technologien ermöglichten es uns, Einblicke zu gewinnen, wie biochemische Signale morphogenetische Ereignisse beeinflussen. Es wird jedoch immer deutlicher, dass neben biochemischen Signalen auch mechanische Hinweise mehrere Aspekte des Zell- und Gewebewachstums beeinflussen. Der Arabidopsis-Schieß-Apischer Meristem (SAM) ist eine kuppelförmige Struktur, die für die Erzeugung aller oberirdischen Organe verantwortlich ist. Die Organisation des kortikalen Mikrotubuli-Zytoskeletts, das apoplastische Zelluloseablagerungen in Pflanzenzellen vermittelt, ist räumlich unterschiedlich. Die Visualisierung und quantitative Bewertung von Mustern kortikaler Mikrotubuli ist notwendig, um die biophysikalische Natur von Zellen am SAM zu verstehen, da Zellulose die steifste Komponente der Pflanzenzellwand ist. Die stereotype Form der kortikalen Mikrotubuli-Organisation ist auch eine Folge der gewebeweiten physikalischen Kräfte, die am SAM vorhanden sind. Die Störung dieser physikalischen Kräfte und die anschließende Überwachung der kortikalen Mikrotubuli-Organisation ermöglicht die Identifizierung von Kandidatenproteinen, die an der Vermittlung von Mechano-Wahrnehmung und Transduktion beteiligt sind. Hier beschreiben wir ein Protokoll, das hilft, solche Prozesse zu untersuchen.