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कैनोरहैब्डिटिस एलिगेंस में हीट शॉक रिस्पांस के प्रेरण को मापने के लिए मानकीकृत तरीके

Published: July 3rd, 2020

DOI:

10.3791/61030

1Department of Biomedical and Chemical Engineering and Sciences, Florida Institute of Technology

Abstract

हीट शॉक रिस्पांस (एचएसआर) साइटोसोलिक प्रोटीन द्वारा प्रेरित एक सेलुलर तनाव प्रतिक्रिया है जो प्रोटीन फोल्डिंग होगोस्टेसिस, या प्रोटेओस्टेसिस को बहाल करने के लिए कार्य करता है। कैनोरहैब्डिटिस एलिगेंस एचएसआर अनुसंधान के लिए एक अद्वितीय और शक्तिशाली जगह है क्योंकि एचएसआर का मूल्यांकन आणविक, सेलुलर और संगठित स्तर पर किया जा सकता है। इसलिए, आणविक स्तर पर परिवर्तनों को सेलुलर स्तर पर कल्पना की जा सकती है और शरीर विज्ञान पर उनके प्रभावों को संगठय स्तर पर मात्रा में बताया जा सकता है। जबकि एचएसआर को मापने के लिए परख सरल हैं, साहित्य में वर्णित समय, तापमान और पद्धति में भिन्नता अध्ययनों में परिणामों की तुलना करना चुनौतीपूर्ण बनाती है। इसके अलावा, इन मुद्दों को अपने अनुसंधान में एचएसआर विश्लेषण को शामिल करने की मांग किसी के लिए एक बाधा के रूप में कार्य करते हैं । यहां, आरटी-क्यूपीसीआर, फ्लोरोसेंट रिपोर्टर्स और एक ऑर्गनाइज्ड थर्मो रिकवरी परख के साथ मजबूत और प्रजनन योग्य तरीके से एचएसआर के प्रडक्शन को मापने के लिए प्रोटोकॉल की एक श्रृंखला प्रस्तुत की जाती है। इसके अतिरिक्त, हम बताते हैं कि एक व्यापक रूप से इस्तेमाल किया थर्मोटोलेंस परख एचएसआर, एचएसएफ-1 के अच्छी तरह से स्थापित मास्टर नियामक पर निर्भर नहीं है, और इसलिए एचएसआर अनुसंधान के लिए इस्तेमाल नहीं किया जाना चाहिए। अंत में, साहित्य में पाए जाने वाले इन परखों में भिन्नता पर चर्चा की जाती है और क्षेत्र में परिणामों को मानकीकृत करने में मदद करने के लिए सर्वोत्तम प्रथाओं का प्रस्ताव किया जाता है, अंततः न्यूरोडीजेनेरेटिव रोग, उम्र बढ़ने और एचएसआर अनुसंधान को सुविधाजनक बनाने के लिए।

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