P. aeruginosa Geïnfecteerde 3D Co-Cultuur van Bronchiale epitheelcellen en macrofagen bij Air-Liquid Interface for Preclinical Evaluation of Anti-Infectives

fDrug onderzoek voor de behandeling van longinfecties vordert naar voorspellende in vitro modellen van hoge complexiteit. De veelzijdige aanwezigheid van bacteriën in longmodellen kan de epitheliale opstelling opnieuw aanpassen, terwijl immuuncellen een ontstekingsreactie tegen de bacteriën in de microomgeving coördineren. Hoewel in vivo modellen de keuze zijn geweest voor het testen van nieuwe anti-infectiemiddelen in de context van cystische fibrose, bootsen ze nog steeds niet nauwkeurig de in vivo omstandigheden van dergelijke ziekten bij de mens en de behandelingsresultaten na. Complexe in vitro modellen van de geïnfecteerde luchtwegen op basis van menselijke cellen (bronchiale epitheel en macrofagen) en relevante ziekteverwekkers kunnen deze kloof overbruggen en de vertaling van nieuwe anti-infectiemiddelen in de kliniek vergemakkelijken. Voor dergelijke doeleinden is een co-cultuurmodel van de menselijke cystische fibrose bronchiale epitheelcellijn CFBE41o^- en THP-1 monocyten-afgeleide macrofagen vastgesteld, die een infectie van het menselijk bronchiale slijmvlies nabootsen door P. aeruginosa bij lucht-vloeibare interface (ALI) voorwaarden. Dit model is opgezet in zeven dagen, en de volgende parameters worden tegelijkertijd beoordeeld: epitheelbarrière integriteit, macrofaag transmigratie, bacteriële overleving, en ontsteking. Het huidige protocol beschrijft een robuust en reproduceerbaar systeem voor het evalueren van de werkzaamheid van geneesmiddelen en reacties die relevant kunnen zijn voor het ontdekken van nieuwe anti-infectiemiddelen en het optimaliseren van hun aerosol levering aan de longen.