Live-Cell Beeldvorming van de levenscyclus van bacteriële Predator Bdellovibrio bacteriovorus met behulp van Time-Lapse Fluorescentie Microscopie

Bdellovibrio bacteriovorus is een kleine gram-negatieve, obligate roofzuchtige bacterie die andere gram-negatieve bacteriën doodt, waaronder schadelijke ziekteverwekkers. Daarom wordt het beschouwd als een levend antibioticum. Om B. bacteriovorus toe te passen als een levend antibioticum, is het eerst noodzakelijk om de belangrijkste stadia van zijn complexe levenscyclus te begrijpen, met name de proliferatie in prooi. Tot nu toe is het een uitdaging geweest om opeenvolgende stadia van de roofzuchtige levenscyclus in real-time te volgen. Hier gepresenteerd is een uitgebreid protocol voor real-time beeldvorming van de volledige levenscyclus van B. bacteriovorus, vooral tijdens de groei in de gastheer. Hiervoor wordt een systeem gebruikt dat bestaat uit een agarosepad in combinatie met celbeeldvormingsschotels, waarin de roofzuchtige cellen zich vrij onder het agarosepad kunnen bewegen terwijl geïmmobiliseerde prooicellen bdelloplasten kunnen vormen. De toepassing van een stam die een fluorescerend gelabelde β-subunit van DNA polymerase III produceert, maakt het verder mogelijk om chromosoomreplicatie te monitoren tijdens de reproductiefase van de B. bacteriovorus levenscyclus.