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Biology

टाइम-लैप्स फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके बैक्टीरियल शिकारी बीडीलोविब्रियो बैक्टीरियोवोस के जीवन चक्र की लाइव-सेल इमेजिंग

Published: May 8th, 2020

DOI:

10.3791/61105

1Department of Molecular Microbiology, Faculty of Biotechnology, University of Wroclaw

Abstract

Bdellovibrio जीवाणु एक छोटा ग्राम नकारात्मक, अनिवार्य शिकारी जीवाणु है कि हानिकारक रोगजनकों सहित अन्य ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया को मारता है। इसलिए इसे लिविंग एंटीबायोटिक माना जाता है। बी बैक्टीरियोवरस को जीवित एंटीबायोटिक के रूप में लागू करने के लिए, सबसे पहले इसके जटिल जीवन चक्र के प्रमुख चरणों को समझना आवश्यक है, विशेष रूप से शिकार के अंदर इसका प्रसार। अब तक, वास्तविक समय में शिकारी जीवन चक्र के लगातार चरणों की निगरानी करना चुनौतीपूर्ण रहा है । यहां प्रस्तुत बी बैक्टीरियोवरसके पूर्ण जीवन चक्र के वास्तविक समय इमेजिंग के लिए एक व्यापक प्रोटोकॉल है, विशेष रूप से मेजबान के अंदर इसके विकास के दौरान। इस उद्देश्य के लिए, एक एगरेग्मेंट पैड से मिलकर एक प्रणाली का उपयोग सेल-इमेजिंग व्यंजनों के संयोजन में किया जाता है, जिसमें शिकारी कोशिकाएं एगर उठे पैड के नीचे स्वतंत्र रूप से स्थानांतरित हो सकती हैं जबकि स्थिर शिकार कोशिकाएं bdelloplasts बनाने में सक्षम हैं। डीएनए पॉलीमरेज III के फ्लोरोसेंटी टैग किए गए एक तनाव का अनुप्रयोग बी बैक्टीरियोवोरस जीवन चक्र के प्रजनन चरण के दौरान गुणसूत्र प्रतिकृति की निगरानी करने की अनुमति देता है।

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