Abstract
Biology
Het isoleren en cultiveren van cardiale myocyten van muizen is essentieel geweest voor het bevorderen van het begrip van hartfysiologie en pathofysiologie. Hoewel het isoleren van myocyten uit neonatale muisharten relatief eenvoudig is, hebben myocyten van het volwassen murinehart de voorkeur. Dit komt omdat in vergelijking met neonatale cellen, volwassen myocyten nauwkeuriger celfunctie samenvatten zoals het voorkomt in het volwassen hart in vivo. Het is echter technisch moeilijk om volwassen muis cardiac myocyten te isoleren in de nodige hoeveelheden en levensvatbaarheid, wat bijdraagt aan een experimentele impasse. Bovendien zijn gepubliceerde procedures specifiek voor de isolatie van atriale of ventriculaire myocyten ten koste van atriale en ventriculaire niet-myocytencellen. Hier beschreven is een gedetailleerde methode voor het isoleren van zowel atriale als ventriculaire cardiale myocyten, samen met atriale en ventriculaire niet-myocyten, tegelijkertijd van een enkel muizenhart. Ook worden de details verstrekt voor optimale celspecifieke culturingmethoden, die de levensvatbaarheid en functie van cellen verbeteren. Dit protocol heeft niet alleen tot doel het proces van volwassen murine hartcelisolatie te versnellen, maar ook om de opbrengst en levensvatbaarheid van cellen voor onderzoeken van atriale en ventriculaire hartcellen te verhogen.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved