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Gleichzeitige Isolierung und Kultur von Atrial Myozyten, ventrikulären Myozyten und Nicht-Myozyten aus einem erwachsenen Mausherz

Published: June 14th, 2020

DOI:

10.3791/61224

1San Diego State University Heart Institute and the Department of Biology, San Diego State University

Abstract

Die Isolierung und Kultivierung von Herzmyozyten von Mäusen war wesentlich für die Förderung des Verständnisses der Herzphysiologie und Pathophysiologie. Während die Isolierung von Myozyten aus neonatalen Mausherzen relativ einfach ist, werden Myozyten aus dem erwachsenen murinen Herzen bevorzugt. Dies liegt daran, im Vergleich zu neonatalen Zellen, erwachsene Myozyten genauer rekapitulieren Zellfunktion, wie es im erwachsenen Herzen in vivoauftritt. Es ist jedoch technisch schwierig, adulte Herzmyozyten in den notwendigen Mengen und Lebensfähigkeit zu isolieren, was zu einer experimentellen Sackgasse beiträgt. Darüber hinaus sind veröffentlichte Verfahren spezifisch für die Isolierung von vorgerichtlichen oder ventrikulären Myozyten auf Kosten von Vorhof- und ventrikulären Nicht-Myozytenzellen. Hier wird eine detaillierte Methode zur Isolierung von vorgerichtlichen und ventrikulären Herzmyozyten, zusammen mit vorbläfernen und ventrikulären Nicht-Myozyten, gleichzeitig von einem einzigen Mausherz beschrieben. Ebenfalls zur Verfügung gestellt werden die Details für optimale zellspezifische Kultivierungsmethoden, die die Zelllebensfähigkeit und -funktion verbessern. Dieses Protokoll zielt nicht nur darauf ab, den Prozess der Isolierung von erwachsenen murinen Herzzellen zu beschleunigen, sondern auch die Ausbeute und Lebensfähigkeit von Zellen für Untersuchungen von atrialen und ventrikulären Herzzellen zu erhöhen.

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