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Biology

Isolamento simultaneo e cultura di miociti atriali, miociti ventricolari e non miociti da un cuore di topo adulto

Published: June 14th, 2020

DOI:

10.3791/61224

1San Diego State University Heart Institute and the Department of Biology, San Diego State University

Abstract

L'isolamento e la ristrutturazione dei miociti cardiaci dai topi è stato essenziale per promuovere la comprensione della fisiologia cardiaca e della fisiopatologia. Mentre isolare i miociti dai cuori neonatali del topo è relativamente semplice, i miociti dal cuore murino adulto sono preferiti. Questo perché rispetto alle cellule neonatali, i miociti adulti ricapitolano più accuratamente la funzione cellulare come avviene nel cuore adulto in vivo. Tuttavia, è tecnicamente difficile isolare i miociti cardiaci del topo adulto nelle quantità e nella vitalità necessarie, il che contribuisce a un'impasse sperimentale. Inoltre, le procedure pubblicate sono specifiche per l'isolamento dei miociti atriali o ventricolari a scapito delle cellule non miociti atriali e ventricolari. Qui descritto è un metodo dettagliato per isolare i miociti cardiaci atriali e ventricolari, insieme ai non miociti atriali e ventricolari, contemporaneamente da un singolo cuore di topo. Sono inoltre forniti i dettagli per metodi di coltivazione ottimali specifici delle cellule, che migliorano la vitalità e la funzione cellulare. Questo protocollo mira non solo ad accelerare il processo di isolamento delle cellule cardiache murine adulte, ma anche ad aumentare la resa e la vitalità delle cellule per le indagini sulle cellule cardiache atriali e ventricolari.

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