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Biology

Y-27632 Bereichert die Ausbeute menschlicher Melanozyten aus erwachsenen Hautgeweben

Published: July 8th, 2020

DOI:

10.3791/61226

1Department of Tissue Engineering and Regeneration, School and Hospital of Stomatology, Cheeloo College of Medicine, Shandong University & Shandong Key Laboratory of Oral Tissue Regeneration & Shandong Engineering Laboratory for Dental Materials and Oral Tissue Regeneration, 2Shijiazhuang Shimen Experimental School, 3Qilu Children's Hospital of Shandong University, 4Qilu Hospital of Shandong University, 5Shenzhen Research Institute of Shandong University

Abstract

Die Isolierung und Kultur von primären Melanozyten aus Hautgeweben ist sehr wichtig für die biologische Forschung und wurde häufig für klinische Anwendungen verwendet. Die Isolierung von primären Melanozyten aus Hautgewebe nach der herkömmlichen Methode dauert in der Regel etwa 3 bis 4 Wochen, um ausreichend zu durchgehen. Noch wichtiger ist, dass die verwendeten Gewebe in der Regel neugeborene Vorhaut sind und es ist immer noch eine Herausforderung, primäre Melanozyten effizient aus erwachsenen Geweben zu isolieren. Wir haben vor kurzem eine neue Isolationsmethode für Melanozyten entwickelt, die Y-27632, einen Rho-Kinase-Inhibitor, zum ursprünglichen Kulturmedium für 48 h hinzufügt. Im Vergleich zum herkömmlichen Protokoll erhöht diese neue Methode dramatisch die Ausbeute von Melanozyten und verkürzt die Zeit, die erforderlich ist, um Melanozyten aus Vorhautgeweben zu isolieren. Wir beschreiben diese neue Methode nun ausführlicher mit Erwachsenenepidermis, um primäre Melanozyten effizient zu kulturieren. Wichtig ist, dass wir zeigen, dass Melanozyten aus erwachsenen Geweben, die mit dieser neuen Methode hergestellt werden, normal funktionieren können. Dieses neue Protokoll wird Studien zu Pigmentdefekten und Melanomen mit primären Melanozyten, die aus leicht zugänglichen erwachsenen Hautgeweben hergestellt werden, erheblich zugute kommen.

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