التصوير والتحليل لنقل الليفية العصبية في العصب الذبي الماوس المخزّن

البوليمرات البروتين العصبية تتحرك على طول محاور في عنصر بطيء من النقل المحوري في متوسط سرعة ~ 0.35-3.5 مم / يوم. حتى وقت قريب كانت دراسة هذه الحركة في الموقع ممكنة فقط باستخدام وضع العلامات النبضية الإشعاعية ، والتي تسمح بتحليل النقل المحوري في الأعصاب الكاملة مع دقة زمنية للأيام ودقة مكانية من ملليمترات. لدراسة نقل الاعصاب في الموقع مع ارتفاع دقة الزمان والمكانية، وضعنا ماوس hThy1-paGFP-NFM المعدلة وراثيا التي تعبر عن البروتين العصبي M الموسومة مع GFP تنشيطها في الخلايا العصبية. هنا نصف التضاء الضوئي تنشيط نبض الهروب والنبض انتشار أساليب لتحليل نقل neurofilament في محاور النخاعية واحدة من الأعصاب التيبية من هذه الفئران السابقين vivo. يتم الحفاظ على أجزاء العصب المعزولة على مرحلة المجهر عن طريق التسريب مع المالحة المؤكسجة وصورة عن طريق المجهر الفلوري الدوار القرص. يستخدم الضوء البنفسجي لتنشيط الفلوريس في نافذة قصيرة محور عصبي. يتم تحليل الفلوريس في المناطق المنشطة والحاصرة بمرور الوقت ، مما يسمح بدراسة نقل الليفية العصبية مع دقة زمنية ومكانية على ترتيب الدقائق والميكرنات ، على التوالي. يمكن استخدام النمذجة الرياضية لاستخراج المعلمات الحركية لنقل الاعصاب بما في ذلك السرعة والتحيز الاتجاهي والسلوك التوقف من البيانات الناتجة. ويمكن أيضاً تكييف طرق الهروب النبضي وانتشار النبض لتصور نقل الليفية العصبية في الأعصاب الأخرى. مع تطور فئران إضافية محورة وراثيا، يمكن أيضا استخدام هذه الأساليب لتصوير وتحليل النقل المحوري للبروتينات الأخرى من الهيتوليات العظمية والبوليتوسولية في المحاور.