Количественная оценка приема макроэлементов в термогенетического нейронального экрана с использованием drosophila Larvae

Поведение кормления и кормления позволяет животным получить доступ к источникам энергии и питательных веществ, необходимых для их развития, здоровья и фитнеса. Исследование нейронной регуляции этих поведений имеет важное значение для понимания физиологических и молекулярных механизмов, лежащих в основе питания гомеостаза. Использование генетически урочищеемых моделей животных, таких как черви, мухи и рыбы значительно облегчает эти типы исследований. В последнее десятилетие, плодовая муха Drosophila меланогастер был использован в качестве мощной модели животных нейробиологов исследования нейронального контроля кормления и кормления поведения. Хотя, несомненно, ценно, большинство исследований изучить взрослых мух. Здесь мы описываем протокол, который использует более простую личиночинок нервной системы для исследования нейрональных субстратов, контролирующих поведение кормления, когда личинки подвергаются воздействию диет, отличающихся содержанием белка и углеводов. Наши методы основаны на количественном колоритном не-выбор кормления анализ, выполненный в контексте нейронной термогенетической активации экрана. Как считыв, количество пищи, съеденной личинками в течение 1 ч интервал был использован при воздействии одного из трех красителей помечены диеты, которые отличаются по своим белкам углеводов (P:C) отношения. Эффективность этого протокола демонстрируется в контексте нейрогенетического экрана в личинке Drosophila, путем выявления кандидатов нейрональных популяций, регулирующих количество пищи, съеденной в диетах различного качества макроэлементов. Мы также смогли классифицировать и группировал генотипы, протестированные на фенотипические классы. Помимо краткого обзора имеющихся в настоящее время методов в литературе, обсуждаются преимущества и ограничения этих методов, а также некоторые предложения о том, каким образом этот протокол может быть адаптирован к другим конкретным экспериментам.