Forberedelse af Rat Vocal Fold til neuromuskulære analyser

Formålet med denne tutorial er at beskrive forberedelsen af rotte vokal fold for histokemisk neuromuskulær undersøgelse. Denne protokol skitserer procedurer for rotte larynx dissektion, flash-frysning, og cryosectioning af vokal folder. Denne undersøgelse beskriver, hvordan man cryosection vokal folder i både langsgående og tværsnit fly. En nyhed i denne protokol er larynx tracking under cryosectioning, der sikrer præcis identifikation af de iboende larynx muskler og reducerer risikoen for vævstab. Tal viser den progressive kryosectioning i begge fly. 29 rotte hemi-larynges blev cryosectioned og spores fra fremkomsten af skjoldbruskkirtlen brusk til udseendet af det første afsnit, der omfattede den fulde vokal fold. Den fulde vokalfold blev visualiseret for alle dyr i begge planer. Der var høj variation i afstanden fra udseendet af skjoldbruskkirtlen brusk til udseendet af den fulde vokal fold i begge fly. Vægten var ikke korreleret til dybden af larynx landemærker, hvilket tyder på individuelle variabilitet og andre faktorer i forbindelse med vævspræparat kan være ansvarlig for den høje variation i udseendet af landemærker under afsnit. Denne undersøgelse beskriver en metode og præsenterer morfologiske data til forberedelse af rotte vokal fold til histokemisk neuromuskulær undersøgelse. På grund af høj individuel variation bør larynx landemærker spores nøje under kryosektion for at forhindre tilsyn med væv og vævstab. Brugen af en konsekvent metode, herunder tilstrækkelig vævsforberedelse og bevidsthed om landemærker inden for rottestrubehovedet, vil hjælpe med ensartede resultater på tværs af undersøgelser og hjælpe nye forskere, der er interesseret i at bruge rottevokalfolden som model til at undersøge larynx neuromuskulære mekanismer.