클라미디아 트라코마티스에서 발달 돌연변이를 식별하고 격리하는 살아있는 세포 앞으로 유전 적 접근

세포 내 세균성 병원체 클라미디아 트라코마티스는 두 가지 형태학적으로 이산적 발달 형태로 구성된 발달 주기를 겪는다. 비 복제 초등체 (EB)는 호스트의 감염을 시작합니다. 일단 내부에, EB는 망상 몸으로 분화 (RB). 그런 다음 RB는 전염성 EB 양식으로 다시 분화하기 전에 여러 차례의 복제를 수행합니다. 이 주기는 세포 모형 사이를 전환하는 실패가 호스트 침입 또는 복제를 방지하기 때문에 클라미홈 생존을 위해 필수적입니다.

클라미디아의 의무적인 세포 내 특성으로 인한 유전 적 기술의 한계는 세포 형 발달에 관여하는 분자 메커니즘의 식별을 방해했습니다. 우리는 살아있는 세포 현미경 검사법과 함께, 실시간으로 세포 형 전환의 시각화를 허용하는 새로운 이중 프로모터 기자 플라스미드 시스템을 설계했습니다. 세포형 발달의 조절에 관여하는 유전자를 확인하기 위해, 살아있는 세포 프로모터-리포터 시스템은 이중 리포터 균주의 화학돌연변이발생, 클라미디아의 화상 진찰 및 추적을 변경된 발달 운동과 결합하여 돌연변이체의 클로나 탈린을 결합하여 전진 유전적 접근법의 발달을 위해 활용되었다. 이 전진 유전 워크플로우는 광범위한 유전 적 경로로 지시 된 심문을 위해 수정 할 수있는 유연한 도구입니다.