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Modelo de lesión renal aguda inducida por cisplatino en pez cebra adulto

Published: May 15th, 2021

DOI:

10.3791/61575

1Department of Immunology, University of São Paulo, 2Department of Medicine, Nephrology Division, Federal University of São Paulo
* These authors contributed equally

Abstract

La cisplatino se utiliza comúnmente como quimioterapia. Aunque tiene efectos positivos en individuos tratados con cáncer, cisplatino puede acumularse fácilmente en el riñón debido a su bajo peso molecular. Tal acumulación causa la muerte de células tubulares y puede inducir el desarrollo de lesión renal aguda (AKI), que se caracteriza por una rápida disminución en la función renal, daño tisular, y la infiltración de células inmunes. Si se administra en dosis específicas cisplatino puede ser una herramienta útil como inductor AKI en modelos animales. El pez cebra ha aparecido como un modelo interesante para estudiar la función renal, la regeneración renal y las lesiones, ya que las estructuras renales conservan similitudes funcionales con los mamíferos. El pez cebra adulto inyectado con cisplatino muestra una menor supervivencia, muerte de células renales y un aumento de los marcadores de inflamación después de 24 h después de la inyección (HPI). En este modelo, la infiltración de células inmunes y la muerte celular se pueden evaluar mediante la citometría de flujo y el ensayo TUNEL. Este protocolo describe los procedimientos para inducir AKI en peces cebra adultos mediante inyección intraperitoneal de cisplatino y posteriormente demuestra cómo recoger el tejido renal para el procesamiento de citometría de flujo y el ensayo TUNEL de muerte celular. Estas técnicas serán útiles para entender los efectos del cisplatino como agente nefrotoxico y contribuirán a la expansión de los modelos AKI en peces cebra adultos. Este modelo también se puede utilizar para estudiar la regeneración renal, en la búsqueda de compuestos que tratan o previenen el daño renal y para estudiar la inflamación en AKI. Además, los métodos utilizados en este protocolo mejorarán la caracterización del daño tisular y la inflamación, que son dianas terapéuticas en las comorbilidades asociadas a los riñones.

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