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Developmental Biology

4D显微镜:使用Nomarski显微镜揭示 秀丽隐杆线虫 胚胎发育

Published: October 8th, 2020

DOI:

10.3791/61736

1CIBIR (Center for Biomedical Research of La Rioja), La Rioja, Spain, 2IBIS (Instituto de Biomedicina de Sevilla), Hospital Universitario Virgen del Rocío/CSIC/ Universidad de Sevilla, Sevilla, Spain

Abstract

4D显微镜是解开不同动物胚胎发育过程的宝贵工具。在过去的几十年里, 秀丽隐杆线虫 已成为研究发育的最佳模型之一。从光学角度来看,其大小和透明体使这种线虫成为DIC(微分干涉对比或Nomarski)显微镜的理想标本。本文说明了生长 秀丽隐杆线 虫,准备和安装其胚胎,进行4D显微镜和细胞谱系示踪的方案。该方法基于Nomarski图像的多焦点延时记录和使用特定软件进行分析。该技术揭示了细胞水平的胚胎发育动力学。突变体中的任何胚胎缺陷,例如纺锤体取向,细胞迁移,凋亡或细胞命运规范方面的问题,都可以有效地检测和评分。实际上,胚胎的每个细胞都可以被跟踪到胚胎开始移动的那一刻。通过4D DIC显微镜追踪 秀丽隐杆线虫 胚胎的完整细胞谱系是费力的,但使用特定软件极大地促进了这项任务。此外,该技术易于在实验室中实现。4D显微镜是一种多功能工具,为胚胎发育进行无与伦比的分析开辟了可能性。

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164 4D DIC Nomarski

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