JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Biochemistry

मुर्गी के अंडों से बाहरी और इनर पेरिविटेललाइन सबलेयर्स का मैकेनिकल सेपरेशन और प्रोटीन घुलनीयकरण

Published: January 27th, 2021

DOI:

10.3791/61739

1Institut National de Recherche pour l'Agriculture, l'Alimentation et l'Environnement, Université de Tours, Biologie des Oiseaux et Aviculture, 37380, Nouzilly, France

Abstract

अंडे की जर्दी को घेरे हुए पेरिविटेललाइन परत निषेचन में, अंडे की रक्षा में, और एवियन भ्रूण के विकास में एक मौलिक भूमिका निभाती है। यह दो प्रोटीनसियस सबलेयर द्वारा बनता है जो कसकर जुड़े होते हैं और अलग-अलग महिला प्रजनन अंगों द्वारा बनते हैं। दोनों संरचनाओं को अपनी कार्यात्मक विशिष्टताएं माना जाता है, जिन्हें परिभाषित किया जाना बाकी है। प्रत्येक सबलेयर रचना प्रोटीन के कार्य की विशेषता के लिए, पहली चुनौती उन स्थितियों को स्थापित करना है जो किसी भी संरचनात्मक क्षति को सीमित करते हुए इन दो जटिल परतों के यांत्रिक पृथक्करण के लिए अनुमति देंगे। दूसरा कदम बाद के जैव रासायनिक विश्लेषणों के लिए इन दो उपलेयरों से प्रोटीन घुलनशीलता की सुविधा के लिए प्रायोगिक स्थितियों का अनुकूलन करना है । सोडियम डोडेसिल सल्फेट-पॉली-एक्रिलमाइड जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस (एसडीएस-पेज) द्वारा प्रत्येक उपलेयर के प्रोटीन प्रोफाइल का विश्लेषण करके इस दृष्टिकोण की दक्षता का आकलन किया जाता है, जो दोनों संरचनाओं के बीच अलग होने की उम्मीद है। यह दो कदम की प्रक्रिया सरल बनी हुई है; इसके लिए शास्त्रीय जैव रासायनिक उपकरण और अभिकर्मकों की आवश्यकता होती है; और आगे में गहराई से प्रोटेओमिक्स के साथ संगत है। यह तुलनात्मक जीव विज्ञान के लिए अन्य एवियन अंडों में भी स्थानांतरित किया जा सकता है, यह जानते हुए कि पेरिविटेललाइन परत की संरचना और संरचना में प्रजातियों की विशिष्ट विशेषताएं दिखाई गई हैं। इसके अलावा, सबलेयर्स सेपरेशन (स्टेप 1) के लिए विकसित गैर-डेनाचरिंग स्थितियां स्कैनिंग और ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा उनके संरचनात्मक विश्लेषणों की अनुमति देती हैं। यह बाद में प्रोटीन शुद्धिकरण के लिए प्रारंभिक कदम भी अपनी संबंधित जैविक गतिविधियों और 3 डी संरचना का विश्लेषण करने के लिए, या आगे इम्यूनोहिस्टोकेमिकल या कार्यात्मक विश्लेषण करने के लिए गठन कर सकता है। इस तरह के अध्ययनों से इन दो उपलेयरों के शारीरिक कार्य को समझने में मदद मिलेगी, जिनकी संरचनात्मक और कार्यात्मक अखंडता प्रजनन सफलता के निर्धारक मानदंड हैं।

Explore More Videos

167

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved