Visualisering av Calcitonin Genrelatert Peptide Immunoreaktiv Innervation av Rat Cranial Dura Mater med Immunofluorescence og Neural Tracing

Målet med denne studien var å undersøke fordelingen og opprinnelsen til calcitonin genrelatert peptid (CGRP)-immunoreaktive sensoriske nervefibre av kranial dura mater ved hjelp av immunfluorescence, tredimensjonal (3D) rekonstruksjon og retrograde sporing teknikk. Her ble nervefibrene og blodkarene farget ved hjelp av henholdsvis immunfluorescens og histokjemiteknikker med henholdsvis CGRP og fluorescerende falloidin. Den romlige korrelasjonen mellom dural CGRP-immuoreaktive nervefibre og blodkar ble demonstrert ved 3D-rekonstruksjon. I mellomtiden ble opprinnelsen til CGRP-immunoreaktive nervefibre oppdaget ved nevral sporingsteknikk med fluorogold (FG) fra området rundt midtre meningeal arterie (MMA) i kranial dura mater til trigeminal ganglion (TG) og cervical (C) dorsal root ganglia (DRGs). I tillegg ble de kjemiske egenskapene til FG-merkede nevroner i TG og DRG også undersøkt sammen med CGRP ved hjelp av doble immunfluorescenser. Ved å dra nytte av den gjennomsiktige helmonterte prøven og 3D-rekonstruksjonen, ble det vist at CGRP-immunoreaktive nervefibre og falloidinmerkede arterioler løper sammen eller separat danner et duralt nevrovaskulært nettverk i en 3D-visning, mens de FG-merkede nevronene ble funnet i oftalmiske, maksillære og mandibulære grener av TG, samt C2-3 DRGs ipsilateral til siden av tracerapplikasjon der noen av FG-merkede nevroner presentert med CGRP-immunoreaktivt uttrykk. Med disse tilnærmingene demonstrerte vi de fordelingsmessige egenskapene til CGRP-immunoreaktive nervefibre rundt blodkarene i kranial dura mater, samt opprinnelsen til disse nervefibrene fra TG og DRGs. Fra metodikkens perspektiv kan det gi en verdifull referanse for å forstå den kompliserte nevrovaskulære strukturen til kranial dura mater under den fysiologiske eller patologiske tilstanden.